Blimp1/PRDM1

第２回東京骨髄病理研究会

B-cellの終末分化†

文献*1

B細胞は抗原刺激に応答して抗体産生細胞である形質細胞へ終末分化をとげる。この分化に先立ち抗体遺伝子のクラススイッチ(class switch recombination: CSR)組み換えや体細胞突然変異(Somatic hypermutation: SHM)が生じる。この変化により抗体結合性向上と多様化が実現される。この後に転写抑制因子であるBlimp-1/ PRDM1が誘導されB細胞の終末分化が駆動される。転写因子Bach2はBlimp-1遺伝子を抑制しつつ, B細胞終末分化過程に伴う抗体遺伝子多様化を統合制御している。

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形質細胞分化に先立つB細胞の変化：CSRとSHM†

Activation-induced cytidine deaminase (AID) 活性化誘導性シチジンデアミナーゼ

 
  • AID= AICDA activation-induced cytidine deaminaseは刺激依存的にIgクラススイッチを起こすB細胞株CH12F3-2で, クラススイッチを誘導する条件で発現が増強する遺伝子として単離された。ヒトでは12p13に局在。
     
  • 遺伝子はシチジンデアミナーゼファミリーに属するRNA編集デアミナーゼをコードしている。
     
  • タンパク質は免疫グロブリンのSHM, 遺伝子変換, CSRを行い,遺伝子の欠損は常染色体潜性高IgM免疫不全症候群type2(HIGM2)の原因となる。
     
  • AIDはシチジンデアミナーゼドメインを持ち成熟B細胞ではほとんど発現せず, 活性化B細胞でのみ発現する。活性化B細胞でもとりわけ胚中心B細胞で強く発現する。形質細胞への分化とともにその発現は再び消失する。
     
  • AIDはシチジンデアミナーゼファミリーの中でもAPOBEC-1ともっとも高い相同性をもつ。APOBEC-1はコレステロールのキャリアタンパク質をコードするapoB100のmRNAの特定のシチジンを脱アミノ化してウラシルに変換することにより，apoB48のmRNAに変換する。
     
  • AID欠損マウスではIgクラススイッチもIgV領域体細胞突然変異も起こらない。 また線維芽細胞などにAIDを発現させるとクラススイッチも体細胞突然変異活性を示すようになるのでAIDはIgクラススイッチとIgV領域体細胞突然変異を誘導するのに必要かつ十分な分子である。
     
  • AIDがどのようにしてCSやSHMをおこすかは以下の２つのモデルが提唱されている。
    • 1. AIDがAPOBEC-1と同様に何らかの標的遺伝子mRNAを編集することで標的遺伝子が機能を変換しクラススイッチや体細胞突然変異をおこす。この場合の標的遺伝子にはクラススイッチの際にS領域の切断やSHMの際に突然変異を導入する酵素などが想定されている。
    • 2. AIDがRNAではなく, DNAに働くと想定。AIDが免疫グロブリン遺伝子のV領域やS領域に働き, DNAを変換し, V領域での塩基の欠失やS領域の切断をおこすというモデル。
       
  • CSRやSHMはゲノムDNAに積極的に変異を導入する反応であり, このような反応がBリンパ球以外の細胞でおきたり抗体遺伝子以外の遺伝子を対象としておきればがん化の原因になるためAIDを厳密に制御することはがん化を防ぐという点で重要と考えられる。実際AIDはがん遺伝子としての作用を有することがマウスモデルで報告されている。*2
 

class switch recombination(CSR)にかかわる転写制御

 
  • 抗体重鎖遺伝子座には抗原認識をする可変領域をコードするVDJエキソン群の下流に定常領域エキソン(C領域)がクラスターを形成し配列している。
     
  • VDJに最も近い上流にはIgMを規定するCμエキソン, 次いでCδエキソンが位置している。未感作(ナイーブ)B細胞では同じVDJ領域をもつ膜型μ鎖, 膜型δ鎖が産生されL鎖と会合し膜型IgM, IgDとなる。
     
  • B細胞が活性化, 分化してIgM分泌形質細胞になるとV領域はそのままの分泌型μ鎖のみを産生するようになりL鎖と会合して分泌型IgMとなる。分泌型/膜型μ鎖, δ鎖いずれが産生されるかはsplicingの違いにより決定される。
     
  • 各アイソタイプ定常領域エキソン直前には特有のサイトカインなど上流シグナルに反応するIプロモーターが存在する。より下流にはIエキソン, およびDNA切断部位のS領域が存在する。
     
  • 活性化B細胞ではCSRに先立って特定のIプロモーターからの転写が誘導され近傍のクロマチン構造が活性化される。
     
  • この後AIDに依存する形でS領域のDNA切断が生じる。AIDの作用機構には不明な点が多い。同時に最上流にあるCμエキソン直上でも同様にDNA切断が生じ, 間にはさまれたDNA領域が除去され両端がDNA損傷修復系により再連結される。
     
  • 結果, VDJ領域の下流に新しい定常領域エキソンが位置するようになり、IgG, A, Eのアイソタイプ抗体がつくられる。
     
  • AIDは同時にVDJ領域への体細胞突然変異導入も何らかのかたちで引き起こす。*3
     

somatic hypermutation (SHM)

 
  • 胚中心ではB細胞が抗原提示細胞やTリンパ球と相互作用し著しく増殖する。この際Igクラススイッチとともに, DNA修復酵素が重鎖VDJエキソン, 軽鎖VJエキソンに作用し個々の塩基配列に点変異を生じる。変異を生じる機構についてはまだよくわかっていない。この変化を体細胞超変異(somatic hypermutation)と呼ぶ。
     
  • この結果少しずつ異なるIgV領域をもつB細胞が生じる。多くの胚中心B細胞は突然変異により抗原への反応性が消失するが, ごく少数親和性が増したIgを産生するB細胞が出現する。低親和性Igを産生するB細胞はアポトーシスを起こす一方, 高親和性Ig産生B細胞は生存し抗原に対し, 非常に親和性の高い可溶性抗体を大量に分泌できるようになる。(Igの親和性成熟 affinity maturation).
     
  • 胚中心B細胞では体細胞突然変異の亢進はIgV領域以外では認められない。
     
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抗体遺伝子自体によるB細胞終末分化の転写制御†

LCR:
通常のエンハンサー活性に加えクロマチン構造を積極的に活性化する作用を有したとえばトランスジーンに連結して染色体に挿入した場合, 周辺クロマチン環境の影響を受けることなく遺伝子を活性化できる。グロビン遺伝子座で最初に同定された。

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転写因子Bach2†

 
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Blimp-1/ PRDM1†

 
 

Gene: IRF4 (also known as MUM-1)--->IRF4 pubmed gene

Gene: Blimp-1(PRDM1 PR domain containing 1, with ZNF domain)--->Blimp-1 pubmed gene

Gene: BACH2 BTB domain and CNC homolog 2 [ Homo sapiens (human)]-->BACH2 pubmed gene

*1  五十嵐和彦ほか　液性免疫応答を制御するBach2転写因子ネットワーク　実験医学 2007; 25(10);162-167
*2  Kotani A, et al, Activation-induced cytidine deaminase (AID) promotes B cell lymphomagenesis in Emu-cmyc transgenic mice.Proc Natl Acad Sci U S A. 2007 Jan 30;104(5):1616-20. Epub 2007 Jan 24.
*3  Snapper CM, et al., The immunoglobulin class switch: beyond "accessibility". Immunity 6(3);217-23:1997
*4  Pinaud E, et al., Localization of the 3' IgH locus elements that effect long-distance regulation of class switch recombination. Immunity. 2001 Aug;15(2):187-99.
*5  Snapper CM, et al., The immunoglobulin class switch: beyond "accessibility". Immunity 6(3);217-23:1997
*6  Oyake T, et al., Bach proteins belong to a novel family of BTB-basic leucine zipper transcription factors that interact with MafK and regulate transcription through the NF-E2 site. Mol Cell Biol. 1996 Nov;16(11):6083-95.
*7  Muto A, et al., Bach2 represses plasma cell gene regulatory network in B cells to promote antibody class switch. EMBO J. 2010 Dec 1;29(23):4048-61.
*8  Hoshino H, Igarashi K. Expression of the oxidative stress-regulated transcription factor bach2 in differentiating neuronal cells. J Biochem. 2002 Sep;132(3):427-31.
*9  Muto A, et al., Bach2 represses plasma cell gene regulatory network in B cells to promote antibody class switch. EMBO J. 2010 Dec 1;29(23):4048-61.
*10  Muto A, et al., The transcriptional programme of antibody class switching involves the repressor Bach2.Nature. 2004 Jun 3;429(6991):566-71.
*11  Muto A, et al. The transcriptional programme of antibody class switching involves the repressor Bach2. Nature. 2004 Jun 3;429(6991):566-71.
*12  Shapiro-Shelef M, et al., Blimp-1 is required for the formation of immunoglobulin secreting plasma cells and pre-plasma memory B cells. Immunity. 2003 Oct;19(4):607-20.
*13  Turner CA Jr, et al., Blimp-1, a novel zinc finger-containing protein that can drive the maturation of B lymphocytes into immunoglobulin-secreting cells. Cell. 1994 Apr 22;77(2):297-306.
*14  Shaffer AL, Blimp-1 orchestrates plasma cell differentiation by extinguishing the mature B cell gene expression program.Immunity. 2002 Jul;17(1):51-62.
*15  Ochiai K et al., Regulation of the plasma cell transcription factor Blimp-1 gene by Bach2 and Bcl6. Int Immunol. 2008 Mar;20(3):453-60. PMID:18256039
*16  Hideshima T, et al., Advances in biology of multiple myeloma: clinical applications. Blood. 2004 Aug 1;104(3):607-18. Epub 2004 Apr 15.
*17  Sciammas R, et al., Graded expression of interferon regulatory factor-4 coordinates isotype switching with plasma cell differentiation. Immunity. 2006 Aug;25(2):225-36.
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