![[PukiWiki]](image/title-logo.png "[PukiWiki]"){kind=logo}
#author("2024-01-31T21:56:44+09:00","","") #author("2024-01-31T22:04:48+09:00","","") [[Haematopathology-WHO 5th classification]] [[CHUBU1215]]&br; [[CHUBU1215]]--骨髄線維化/線維症を呈する造血器疾患の鑑別&br; [[血液腫瘍病理学]] *Acute megakaryoblastic leukaemia- WHO 5th classification [#n7db86c4] Myeloid proliferations and neoplasms-- Acute myeloid leukaemia-- Acute myeloid leukaemia, defined by differentiationのうちの一項目として Acute megakaryoblastic leukaemiaが記述される. ---&ref(AMKL-WHO5th.txt); ''定義'': 急性巨核球性白血病（AMKL）は、&color(#e60033){''巨核球分化を伴う芽球が20％以上である''};ことを特徴とする。 [芽球が80%の症例でそのうち20%が巨核球系, 60%が非巨核球系でもAMKLということ？?] ''診断基準 - Essential and desirable'' Essential 必須の診断項目 - ''骨髄および/または末梢血中に巨核球分化を伴う芽球が20％以上''存在する。 #br - &color(#e2041b){''芽球は少なくとも1つ以上の血小板糖蛋白を発現している： CD41、CD61またはCD42bを発現''};している。 #br - 他の定義されたAML型の基準を満たさない。除外診断. #br - 骨髄増殖性新生物の既往がない。myelofibrosis, MDSなど #br 望ましい診断項目 - ダウン症候群の可能性の評価 #br >急性巨核芽球性白血病(AMKL)患者は,ダウン症児（ダウン症に伴う骨髄増殖症を参照）,ダウン症のない小児,および成人の 3 つの臨床グループに分類される。~ -AMKLはAMLの3-5％を占め,二峰性の分布を示し,幼児で多く(小児AMLの4-15%), 成人ではまれである(AMLの1-2%).¬e{:Gruber TA, James R Downing JR. The biology of pediatric acute megakaryoblastic leukemia. Blood 2015 Aug 20;126(8):943-9. PMID: 26186939};¬e{Lopez:Lopez CK, et al. Pediatric Acute Megakaryoblastic Leukemia: Multitasking Fusion Proteins and Oncogenic Cooperations.Trends Cancer 2017 Sep;3(9):631-642. PMID: 28867167};¬e{Mac:McNulty M, et al. Acute Megakaryocytic Leukemia. Cold Spring Harb Perspect Med 2020 Feb 3;10(2):a034884. doi: 10.1101/cshperspect.a034884.PMID: 31548219 Free PMC article (Review)};. #br -ダウン症以外の小児に発生する症例の大部分(75%以上)は, CBFA2T3::GLIS2（ETO::GLIS2）,RBM15::MRTFA（旧MKL1）,NUP98::KDM5A,KMT2A転座など白血病発生を促進する融合癌遺伝子をコードする染色体転座を有する.¬e{Lopez:Lopez CK, et al. Pediatric Acute Megakaryoblastic Leukemia: Multitasking Fusion Proteins and Oncogenic Cooperations.Trends Cancer 2017 Sep;3(9):631-642. PMID: 28867167}; #br -CBFA2T3::GLIS2を有する症例では,融合蛋白質は白血病発生に十分であると考えられている。一方,他の融合蛋白質は付加的な変異(NUP98::KDM5AとRB1変異,KMT2A再配列とRAS変異,HOX融合事象とMPL変異)と共存する¬e{Rooij:de Rooij JDE, Cristyn Branstetter C, et al. Pediatric non-Down syndrome acute megakaryoblastic leukemia is characterized by distinct genomic subsets with varying outcomes. Nat Genet 2017 Mar;49(3):451-456. doi: 10.1038/ng.3772. Epub 2017 Jan 23.PMID: 28112737 Free PMC article};¬e{Lopez:Lopez CK, et al. Pediatric Acute Megakaryoblastic Leukemia: Multitasking Fusion Proteins and Oncogenic Cooperations.Trends Cancer 2017 Sep;3(9):631-642. PMID: 28867167};¬e{:Bolouri H, Jason E Farrar JE, et al. The molecular landscape of pediatric acute myeloid leukemia reveals recurrent structural alterations and age-specific mutational interactions. Nat Med 2018 Jan;24(1):103-112. doi: 10.1038/nm.4439. Epub 2017 Dec 11.PMID: 29227476 Free PMC article}; #br -融合蛋白を伴わない小児症例は,しばしば21番染色体 Down syndrome critical region(DSCR:)の限局性増幅を伴うダウン症候群症例と類似している.この領域には巨核球形成に関与するいくつかの遺伝子（RUNX1,ERG,ETS2）とGATA1(50％)およびコヒーシン／CTCFの変異が含まれる.¬e{Rooij:de Rooij JDE, Cristyn Branstetter C, et al. Pediatric non-Down syndrome acute megakaryoblastic leukemia is characterized by distinct genomic subsets with varying outcomes. Nat Genet 2017 Mar;49(3):451-456. doi: 10.1038/ng.3772. Epub 2017 Jan 23.PMID: 28112737 Free PMC article};¬e{Mac:McNulty M, et al. Acute Megakaryocytic Leukemia. Cold Spring Harb Perspect Med 2020 Feb 3;10(2):a034884. doi: 10.1101/cshperspect.a034884.PMID: 31548219 Free PMC article (Review)}; #br -成人に発生する症例はあまり明確ではなく,通常TP53,RB1,コヒーシン複合体,スプライシング因子,ASXL1およびDNMT3Aに変異がある¬e{Mac:McNulty M, et al. Acute Megakaryocytic Leukemia. Cold Spring Harb Perspect Med 2020 Feb 3;10(2):a034884. doi: 10.1101/cshperspect.a034884.PMID: 31548219 Free PMC article (Review)};. *急性巨核球性白血病 acute megakaryoblastic leukaemia (M7) [#ee9422ce] //参考症例 H12-02676(bone marrow biopsy) //H0900156 SuzMar 57F WHO 4th ed. revised の定義¬e{:WHO blue book: Tumor of haematopoietic and lymphoid tissues pp162-165};：Aute myeloid leukemia, NOSの一型であるAcute megakaryoblastic leukemia. FAB分類のAML-M7 急性白血病の一型で&color(#e2041b){''20%以上に増えた芽球の少なくとも半数(50%)が巨核球系であるもの。''}; ''MDS leukemiaから移行した例や, &color(blue){''t(1;22)(p13;q13), inv(3)(q21;q26.2), t(3;3)(q21;q26.2)''};をもつAML例(AMKLの血液像を示す), Down症候群関連の症例''は, &color(crimson){%%%このカテゴリ－には含まない%%%};。 #br -acute myeloid leukaemia with myelodysplasia-related changes (AML-MRC)：除く -therapy-related acute myeloid leukaemia: 除く -AML associated with t(1;22)(p13;q13): '''''RBM15-MKL1''''' 除く -AML associated with inv(3)(q21q26.2) or t(3;3)(q21;q26.2): '''''RPN1 - EVI1''''' 除く. -Acute megakaryoblastic leukaemia occuring in a patient with Down syndromeは myeloid leukaemia associated with Down syndromeに分類する. #br #br 以下3群の患者さんに, おのおの異なったタイプのAMKLが起こりうる. 1) ''Down症の小児''：WHO分類でDown症候群関連骨髄増殖性疾患(Myeloid proliferations associated with Down syndrome)として独立した疾患とされる. 2) ''Down症候群以外の小児'': 乳児では大部分の症例がWHO分類の''AML with t(1;22)(p13;q13); '''RBM15-MKL1'''''に相当. 年長児では, t(10;11); CALM-AF10, t(9;11), +8, +21など様々な染色体, 遺伝子異常を伴った症例が見られる. 3) ''成人''; 特定の遺伝子異常のみられない症例(AML-NOS)が多い. AML with inv(3)(q21q26.2) or t(3;3)(q21;q26.2); RPN1-EVl1ではAMKLの細胞形態所見を示すことがある. >''AMKL-NOS'' -染色体;'' -5, -7, +8, 11q 関連の異常''などが認められる. #br -Young adultにおける縦隔胚細胞腫瘍とAMKL合併例にはいくつかの染色体異常が知られている. ''i(12p)が特徴的''である. >''AML with t(1;22)(p13;q13); '''RBM15-MKL1''''' -'''RBM15-MKL1'''fusionによりRBM15(RNA-binding motif protein-15; OTTともよばれる)とMKL1(megakaryocyte leukemia-1; MALともよばれる)の融合キメラタンパクRBM15-MKL1(OTT-MAL)が産生される. #br -'''''RBM15'''''はHoxの機能やRasシグナル伝達の調節にかかわり, '''''MKL1'''''はクロマチン構築に関連するDNA結合モチーフをもつ.融合遺伝子はクロマチンの構築やHoxで誘導される分化とシグナル伝達に影響を与え白血病発症に関わる可能性がある. ***病理組織, 細胞所見 [#w129950b] 末梢血のsmall megakaryoblast(micromegakaryoblast); 中程度のN/C比, 細胞質のbudding（出芽), 微細な網目状クロマチンをもつ円形核をもつ。~ megakaryoblastは多彩な形態のため巨核球系であることの証明に, しばしば免疫染色が必要となる。''CD41, CD42b, CD61''染色陽性が巨核球系の証明となる. #gallery(left,nowrap,noadd){{ M7_01PB.jpg>megakaryoblast M7_02PB.jpg>megakaryoblast }} #br ''CD41(anti-GPⅡb)''は''巨核芽球の幼弱な段階より検出され頻用される''。CD41(=platelet fibrinogen receptor alpha subunit)は血小板凝集に必要な糖タンパク. ただしCD41は%%ホルマリン固定パラフィン組織にうまく適応できる市販抗体がない%%。最近パラフィン切片に使えるCD41抗体が販売されています. 組織にはCD42b, CD61も使える.FCMではCD41が使われる. 血小板には，10種類以上の接着分子が存在する. そのうち''CD41(GPⅡb/Ⅲa)，CD42b(GPⅠbα)''は, &color(red){''血小板だけに存在し，粘着(細胞-基質)，凝集(細胞-細胞)に深く関わっている血小板膜糖蛋白である''};. -''CD41(GPⅡb/Ⅲa)''は血小板が刺激を受けて活性化されると，リガンド結合部位が露出しフィブリノゲンレセプターとしての機能発現が誘導される. -''CD42b(GPⅠbα)''は内皮下組織に含まれるコラーゲンに結合して構造変化を起こしたvWFのレセプターとして結合する -CD61(血小板糖タンパクGPⅢa) 分子量110kDaのインテグリンβ3サブユニット.インテグリンαⅡb鎖（CD41）と非共有結合的に会合してGPⅡb/Ⅲa複合体（αⅡbβ3インテグリン）を形成する.CD41とは別に,インテグリンαV鎖（CD51）とも会合してビトロネクチンレセプタ（αVβ3インテグリン）を形成している.CD41/CD61は血小板と巨核球のみに発現しますが,CD51/CD61は,破骨細胞,内皮細胞,マクロファージ,線維芽細胞,平滑筋,滑膜細胞,腎糸球体にも発現がみられる. #clear #br #br ''巨核芽球megakaryoblast'' -通常は中型ないし大型細胞で核は円形, ないしわずかに不整形。核クロマチンは他のAML芽球に比べてより濃縮した傾向をしめす。しばしば異型巨核球のような成熟した所見を呈することがある。1-3個の核小体をもつ。 #br -生検組織でも, 特徴のない芽球から異型巨核球と形態的に同定できる細胞までの移行像がみられることがある。 #br -細胞質は好塩基性で顆粒が見られることもある。 #br -細胞質辺縁はぎざぎざで細胞突起や偽足が巨核芽球の特徴になる。 #br -ときにN/C比が高い細胞質の乏しい小型の芽球で、リンパ芽球との鑑別が困難である。 #br -骨髄スメアで巨核芽球が細胞塊をつくるように凝集し転移腫瘍細胞によく似ることがある。 #br -MPO, naphtolAS-DCAE, SudanBはつねに陰性。 #br -''PAS染色, AcP(acid phosphatase)染色''が陽性となることがある。 #br -非特異的エステラーゼが細胞質に斑点状あるいは部分的に陽性のことがある。 #br ''骨髄生検組織'' #ref(M7_biopsyMG.jpg,around,right,60%); 1. &color(magenta){''芽球増生の著明な%%%髄様組織%%%をしめすmegakaryoblastic leukaemia''};と 2. &color(darkmagenta){''芽球の増殖が乏しく, myelofibrosisのみがめだつ２つのタイプ''};がある。 -骨髄生検組織所見は多彩な像をしめす。急性リンパ球性白血病のような像から、転移腫瘍のときに見られるような広範囲な線維化まである。''一般的には小児例では細胞は一様であることが大変多い''。 #br -骨髄線維化は t(1;22)をもつ新生児 acute megakaryoblastic leukaemiaに特徴的なものではなく巨核球成分の著明な, どの白血病にも普通に認められる。 #br -線維化により（巨核芽球が産生するfactorによると推測されている)骨髄穿刺吸引は不成功のことが多く, 診断に骨髄生検が必要となる。 #br -''年長児から成人のmegakaryoblastic leukaemiaでは''多系統の異常/異形成がよく認められる''。 #br -''myeloblastが増殖し&color(#e60033){Auer rod};を認めることあり''。 #br -顆粒球系造血が著しく異形なことがあり、同様に赤芽球系にも異形細胞の増加がよく認められる。 ''phenotype''&br; 陽性マーカ: -''CD41, CD61''(巨核球マーカ), ''CD42b''¬e{:Orazi A, et al. Acute panmyelosis with myelofibrosis: an entity distinct from acute megakaryoblastic leukemia. Mod Pathol. 2005 May;18(5):603-14.PMID:15578075};, CD34(成熟巨核球に染まることがある), CD36, factor VIII. -陽性にバラツキあり; &color(red){''CD13, CD33, CD71, alpha naphthyl acetate esterase, PAS and HLA-DR -alpha-1-antitrypsin, alpha-1-antichymotrypsin, lysozymeがまれに陽性を示す.¬e{:Vago JF, et al. Acute megakaryocytic leukemia with myeloid/monocytic differentiation. Am J Surg Pathol. 1987 Nov;11(11):883-9.PMID:3674284}; 陰性マーカ: -&color(blue){''Myeloperoxidase, Sudan Black B, CD14, CD64, glycophorin''}; #br #br **Acute megakaryoblastic leukaemiaが疑われる症例 Case 01 [#w9929e14] //H1202676 70歳代 男性. ~ A病院にて, 4年前に腹部大動脈解離性大動脈瘤, 解離性大動脈瘤により人工血管置換術施行し以後経過観察中. 汎血球減少, 心不全で入院. Hb 5.7x10SUP{SIZE(8){4}}; WBC1370/μl, plt1.8x10SUP{SIZE(8){4}};. 末梢血芽球＋. ~ 骨髄穿刺はdry tapであった. 紹介され骨髄生検を行う. ''骨髄生検組織所見'' > &ref(KurYas-HE01.jpg,,60%); &ref(KurYas-Ag.jpg,,60%); //|&photo(ASD01.jpg);|&photo(ASD02.jpg);|&photo(togin01ok.jpg);|&photo(togin02ok.jpg);| //|CENTER:ASD-Giemsa x40|CENTER:ASD-Giemsa x40|CENTER:鍍銀 x40|CENTER:鍍銀 x40| 骨髄生検組織: 骨梁は軽度に肥厚している. 明瞭な硬化像はない. 鍍銀染色でびまん性に線維増生が認められる. #br #gallery(left,nowrap,noadd){{ HEneu-OK.jpg>A, HE HEneu-hpf-OK.jpg>B, HE HE-oligo-hpf-OK.jpg>C, HE }} Bone marrow biopsy HE染色: A: 脂肪細胞は減少しているが線維化により造血細胞は疎になっている. B:小型Mgkが散在性に多数認められる.核は類円形, 小型低分葉の細胞が多く, 分離円形核をもつ異形成Mgkが出現している. C:骨梁に沿って赤芽球が局在している. 通常は顆粒球系細胞が骨梁辺縁に局在する. #br #br **Acute megakaryoblastic leukaemia--Case02 [#mc2b6672] IWT case **Acute megakaryoblastic leukaemiaの病理 [#uf8c5917] ''末梢血所見'' 巨核芽球(megakaryoblasts)が末梢血に出現する. 微小巨核球(micromegakaryocytes), 断片状の巨核球, 異常大型血小板, 低顆粒成熟好中球などMDSにみられる異常血球が認められることがある. 骨髄細胞所見；しばしば骨髄線維化のためdry tapになり骨髄生検を要し, スメアの作成が難しいことがある. 可能な限り生検と併用して観察する. 巨核芽球(megakaryoblasts); 通常, 中ないし大型細胞. 円形ないし陥凹したやや不整形な核をもつ. 核クロマチンは繊細で, 1-3個の核小体が認められる.&br; 細胞質は好塩基性. 顆粒はみられない. cytoplasmic bleb(細胞質突起)や偽足をもつことがあり, 巨核芽球の特徴とされる. ときに小型で, N/C比大のリンパ芽球に類似した形態のこともある. 微小巨核球(前骨髄球までの大きさの細胞)が出現することがあり, 凝集したクロマチンと１～２個の核, 成熟した細胞質をもつ.~ 巨核芽球とカウントしないことが必要. &color(blue){''巨核芽球には血小板産生はみられない''};ことが鑑別のひとつになる. AML with inv(3)(q21.3q26.2)あるいはt(3;3)(q21.3q26.2), '''GATA2/MECOM''' fusionでは, 多系統血球形態異常がしばしば認めら, 巨核芽球に異形成が著しい.[定義上, この核型異常をもつ症例はAML-M7には含まれないことに注意] SudanblackB(SBB), Naphtol-ASD-CAE, MPOは&color(blue){''常に陰性. ''}; PAS染色が陽性になることがある. 酸ホスファターゼも陽性になることがある. 非特異的エステラーゼが斑状, または部分的に陽性のことがある. ''骨髄組織所見'' 正形成髄ないし過形成髄を呈する. 造血巣には, &color(#e83929){''巨核芽球と種々の成熟段階の異型巨核球が優位に増殖する''};. 両者の比率は症例によりさまざま. 小型巨核球が一様に増殖する症例では他のAML病型と形態的に区別ができないときがある. 巨核芽球とともに''多数の成熟巨核球が増殖する症例もある''が, このときの&color(#e60033){成熟巨核球は一般に小型で, 低分葉核をもち異形成がめだつ};. 微小巨核球が孤在性にあるいは集簇して多数認められる場合もある. クロマチンに濃染する1-2個の成熟核をもち成熟巨核球にみられる淡好酸性細胞質をわずかに有する細胞として見られる. 組織切片で巨核球系と同定するにはCD42b, CD61などの免疫染色が必要になる. 骨髄系, 赤芽球系の幼若細胞や異型細胞が混在することがあるが数はすくない. 骨髄線維症をともなうことがAML-M7の重要な特徴であるが, &color(#e2041b){''必発ではない. 髄様の病変の症例がある.''}; 弾性線維増殖であることが多いが, ところどころに膠原線維の増生を伴うことがある. (鍍銀染色, EVG, Azan染色で評価する) 組織化学, 免疫染色 #br #br #br *Acute panmyelosis with myelofibrosis (APMF) [#hb7f91bf] ''WHO 2017 4th Edの定義'' 急性の汎骨髄性増殖症panmyeloid proliferationで芽球が増加し(骨髄あるいは末梢血細胞の≧20%) 骨髄線維症を合併する. ● 反復する遺伝子異常を示すAML~ ● Acute myeloid leukaemia with myelodysplasia-related changes~ ● 治療関連AML~ いずれにも含まれず, 上記グループのいずれのクライテリアも満たさない. -&color(blue){acute megakaryoblastic leukaemia(M7)と臨床像, 血液病理所見が部分的にOverlapする.}; &color(#e2041b){''APMFは非常にまれなAMLの一形態''};で, de novoの疾患. 基本的には成人の疾患であるが, 小児の報告もある. 衰弱や疲労感で急激に発病する. 多くは, 発熱や骨痛をきたす. 通常全身状態の急激な悪化がみられる. 汎血球減少症が常に出現し, 脾腫は認められないかごく軽度である. ''末梢血'' -&color(crimson){''顕著な汎血球減少症を呈する.''}; -赤血球はanisopoikilocytosisはないか, まれ. 種々の程度のmacrocytosisが認められる. 赤芽球出現はまれに認められるが, teardrop-shaped cells(dacrocytosis)は観察されない. -好中球前駆細胞, 芽球がしばしば出現する. &br; 顆粒球系細胞の異形成が高頻度にみられるが, AML with myelodysplasia-related changesのクライテリアには適合しない. -異常な血小板がよく認められる. ''骨髄所見'' -骨髄吸引はしばしばうまくいかない(dry tap)ため, 骨髄生検と免疫染色が診断に必要である. -過形成髄で, びまん性の線維性間質あり. 3系統造血細胞の増多が認められる;&color(crimson){panmyelosis};とよび, 各系統の相対的増加度はいろいろである. -特徴的な所見は芽球の集簇巣が, 好酸性の細胞質をもつ小型優位な, 異形成巨核球とともに認められることである. -異形成Mgkは低分葉核や 分葉しないクロマチンの疎な核をもつ細胞として確認できる. microMgkが増えるが芽球とまちがえてカウントしないことが大切である. -small/ microMgkの確認にはPAS染色や, 免疫染色 (CD42b, CD61, CD41他)が有用になる. -APMFの骨髄芽球増加の程度はさまざまである. 中央値 22.5%とする報告がある. 多くの例では20-25%. -骨髄線維化の程度もさまざまであり, 鍍銀染色で黒色の繊細な弾性線維増加が見られる. &color(blue){''膠原線維増多は弾性線維増加にくらべ頻度が低い.''}; ''immunophenotype 免疫染色'' 細胞が採取可能な場合は, 芽球はCD34, C-KIT, CD33, CD13が種々の程度に陽性を示す. MPOは通常陰性になる.Naphtol-ASD-CAEも不染.
