ASD-Giemsa染色 -骨髄組織染色法
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[[Wikipathologica-KDP]]
[[骨髄病理のお勉強:https://www.wikipatho-kdp.website/?Bon...
*骨髄クロット・生検組織のナフトールAS-Dクロロアセテート・...
''磐田市立総合病院病理診断科 黒田志保，KDP病理診断科クリ...
注：一枚一枚スライドグラスに染色液をのせる、&color(red){'...
名古屋第一赤十字病院 伊藤雅文先生 絶賛の染め上がりです...
#br
下記骨髄組織病理学序に伊藤雅文先生が述べておられるように,...
今では, 骨髄病理診断は、HE染色に代わり, ほとんどをASD-Gie...
例外は, 癌腫の骨髄転移の場合(癌はみなれたHE染色のほうが良...
また、巨核球はASD-Giemsaの染まりの良悪にもよりますが, HE...
#br
***骨髄ASD-Giemsa染色 (平林) [#k812f0ac]
Naphthol-ASD-CAE stainの骨髄組織への応用(Leder法)+Giemsa...
骨髄組織病理学 伊藤雅文先生の序から.
(骨髄組織病理の)理解を決定的に進めたものは染色技術である...
諸外国の骨髄病理研究者に我々の標本を見せると、まず通常のH...
（伊藤雅文 骨髄組織病理 文光堂第1版序)
***試薬の調整 [#c52c9cf9]
>(1)液：&color(#c71585){''4%ニューフクシン液--ニューフク...
-&color(blue){''長期保存可, 使用時はよく混和して用いるこ...
-作成時ニューフクシンが液面に浮いてしまうのでスターラーで...
-''2N塩酸：濃塩酸6ml＋蒸留水28.8ml''を混ぜたもの。
>(2)液：&color(#cd853f){''4%亜硝酸ナトリウム溶液''};, ( '...
>(3)液：&color(#ff1493){''ナフトールAS-Dクロロアセテート...
-&color(#ff1493){''ナフトールAS-Dクロロアセテート(-20℃冷...
--ガラスビーカーで溶かすこと。換気のよいところで作業をお...
--(3)液を調整したら250μlづつ(1回分)マイクロチューブに分注...
（当院での検討では1ヶ月以上保存が可能のようです)
>pH7.4 リン酸緩衝液
>pH6.6 リン酸緩衝液
>ギムザ染色液: pH6.6リン酸緩衝液 2.5mlにメルク製ギムザ液...
>酢酸液: 50mlの蒸留水に酢酸原液(氷酢酸；扱い注意)をスポイ...
**染色手技 [#s8ecc79b]
>１．10ml スピッツに(1)液 12.5μl, と(2)液 12.5μlを使用直...
>２．上記混合液にpH7.4リン酸緩衝液を加えて全量を4.75mlに...
>３．A液に(3)液250μlを使用直前に混ぜ, 染色液とする。(混濁...
>４．３をまぜたらスライドに液をのせて、すぐに染色を開始す...
>&ref(ASD-macro01.jpg); &ref(ASD-macro02.jpg,around,);
最初は白濁したピンク色の染色液の白濁がとれてローズ色の結...
>５．軽く水洗して染色のチェック--顆粒球の細胞質がローズピ...
>６．ギムザ染色液をのせて30分染色。
>７．酢酸液で分別する。&color(red){ギムザ液単独の染色時と...
>８．イソプロパノール・アセトン等量混合液 脱水-- ギムザ...
>９．透徹、封入して染色完了。
>7,8はドーゼの液内でスライドを5-6回上下させてなじませる。...
>ニューフクシンはアルコール系薬剤と''キシレン系薬剤に溶け...
>生検組織で脱灰が必要な場合。&color(red){蟻酸あるいはKCX...
**試薬購入先と価格 [#lf78b78c]
>当院で使用している試薬です。これがベストのお薦めというわ...
-ニューフクシン（Wako) 25g 8200円
-亜硝酸ナトリウム(Wako) 25g 1250円
-ナフトールAS-D クロロアセテート(シグマ) 250mg 3400円<--...
)
-pH 7.4 リン酸緩衝液用粉末 (Wako) 1L用x20 3800円
-N, N-ジメチルホルムアミド (Wako) 100ml 1500円
**染色の実際 [#gd500713]
>ナフトールASD/Giemsa染色がうまくいっているかどうかを判断...
>赤血球が緑がかって染まるときは分別不足です。 もう少し分...
>酸性化したホルマリンで固定すると染まりが悪くなります。
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[[骨髄病理のお勉強:https://www.wikipatho-kdp.website/?Bon...
*骨髄クロット・生検組織のナフトールAS-Dクロロアセテート・...
''磐田市立総合病院病理診断科 黒田志保，KDP病理診断科クリ...
注：一枚一枚スライドグラスに染色液をのせる、&color(red){'...
名古屋第一赤十字病院 伊藤雅文先生 絶賛の染め上がりです...
#br
下記骨髄組織病理学序に伊藤雅文先生が述べておられるように,...
今では, 骨髄病理診断は、HE染色に代わり, ほとんどをASD-Gie...
例外は, 癌腫の骨髄転移の場合(癌はみなれたHE染色のほうが良...
また、巨核球はASD-Giemsaの染まりの良悪にもよりますが, HE...
#br
***骨髄ASD-Giemsa染色 (平林) [#k812f0ac]
Naphthol-ASD-CAE stainの骨髄組織への応用(Leder法)+Giemsa...
骨髄組織病理学 伊藤雅文先生の序から.
(骨髄組織病理の)理解を決定的に進めたものは染色技術である...
諸外国の骨髄病理研究者に我々の標本を見せると、まず通常のH...
（伊藤雅文 骨髄組織病理 文光堂第1版序)
***試薬の調整 [#c52c9cf9]
>(1)液：&color(#c71585){''4%ニューフクシン液--ニューフク...
-&color(blue){''長期保存可, 使用時はよく混和して用いるこ...
-作成時ニューフクシンが液面に浮いてしまうのでスターラーで...
-''2N塩酸：濃塩酸6ml＋蒸留水28.8ml''を混ぜたもの。
>(2)液：&color(#cd853f){''4%亜硝酸ナトリウム溶液''};, ( '...
>(3)液：&color(#ff1493){''ナフトールAS-Dクロロアセテート...
-&color(#ff1493){''ナフトールAS-Dクロロアセテート(-20℃冷...
--ガラスビーカーで溶かすこと。換気のよいところで作業をお...
--(3)液を調整したら250μlづつ(1回分)マイクロチューブに分注...
（当院での検討では1ヶ月以上保存が可能のようです)
>pH7.4 リン酸緩衝液
>pH6.6 リン酸緩衝液
>ギムザ染色液: pH6.6リン酸緩衝液 2.5mlにメルク製ギムザ液...
>酢酸液: 50mlの蒸留水に酢酸原液(氷酢酸；扱い注意)をスポイ...
**染色手技 [#s8ecc79b]
>１．10ml スピッツに(1)液 12.5μl, と(2)液 12.5μlを使用直...
>２．上記混合液にpH7.4リン酸緩衝液を加えて全量を4.75mlに...
>３．A液に(3)液250μlを使用直前に混ぜ, 染色液とする。(混濁...
>４．３をまぜたらスライドに液をのせて、すぐに染色を開始す...
>&ref(ASD-macro01.jpg); &ref(ASD-macro02.jpg,around,);
最初は白濁したピンク色の染色液の白濁がとれてローズ色の結...
>５．軽く水洗して染色のチェック--顆粒球の細胞質がローズピ...
>６．ギムザ染色液をのせて30分染色。
>７．酢酸液で分別する。&color(red){ギムザ液単独の染色時と...
>８．イソプロパノール・アセトン等量混合液 脱水-- ギムザ...
>９．透徹、封入して染色完了。
>7,8はドーゼの液内でスライドを5-6回上下させてなじませる。...
>ニューフクシンはアルコール系薬剤と''キシレン系薬剤に溶け...
>生検組織で脱灰が必要な場合。&color(red){蟻酸あるいはKCX...
**試薬購入先と価格 [#lf78b78c]
>当院で使用している試薬です。これがベストのお薦めというわ...
-ニューフクシン（Wako) 25g 8200円
-亜硝酸ナトリウム(Wako) 25g 1250円
-ナフトールAS-D クロロアセテート(シグマ) 250mg 3400円<--...
)
-pH 7.4 リン酸緩衝液用粉末 (Wako) 1L用x20 3800円
-N, N-ジメチルホルムアミド (Wako) 100ml 1500円
**染色の実際 [#gd500713]
>ナフトールASD/Giemsa染色がうまくいっているかどうかを判断...
>赤血球が緑がかって染まるときは分別不足です。 もう少し分...
>酸性化したホルマリンで固定すると染まりが悪くなります。
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